電泳洗脫法回收酶切DNA片段

    （1）用合適的酶切割DNA并電泳。
　�。�2）于紫外燈下從凝膠上切下所要的DNA帶，裝入含1×TBE緩沖液的透析代內(nèi)，用夾子封好袋口，并檢查有無(wú)漏孔。
　�。�3）將透析袋（縱長(zhǎng)）與兩極間的邊線(xiàn)垂直放于電泳槽內(nèi)電泳，4～5V/cm電泳至DNA貼緊袋壁。
　　（4）取出透析袋，擠出凝膠塊，吸出袋內(nèi)液體放入1.5ml的離心管內(nèi)，10000rpm離心5min。
　　（5）吸出上清放入離心管內(nèi)，加入等體積的飽和酚和等體積的氯仿，振蕩混勻，10000rpm離心5min，吸出上清放入新的離心管內(nèi)。
　　（6）加入1/10體積的3mol/L AaAc,2倍體積預(yù)冷的無(wú)水乙醇，于-20℃放置4～5h。
　�。�7）于4℃，10000rpm離心15min，棄上清。
　　（8）用75%的酒精洗滌2次，每次均于4℃，10000rpm離心5min，棄上清。
　�。�9）真空抽干，并用適量1×TE溶解沉淀。如此即得所需DNA片段。